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HuH-7人肝癌细胞培养方法

实验人员的无菌准备

1、肥皂洗手

2、穿好隔离衣，换好拖鞋

3、用75%的酒精棉球擦拭双手

服务流程：

预约登记→办理相关手续→复苏细胞→细胞质量检查→发送细胞（或自己来取细胞）→细胞售后技术咨询答疑。

养方法如下：

1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后，仔细剥除脑膜、血管和纤维成分，置Hanks液中漂洗一、二次。

2、置于30—50倍体积的Hanks液中，此时脑组织比较柔软，反复吹打即制成细胞悬液。

3、把悬液注入离心管室温中直立5—10分钟后，细胞或细胞团快自然下沉，脂肪等杂物易漂浮，可吸除上层、反复二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎块并获较多细胞成分。

4、在沉降物中加入适量培养液，通过纱网成纱布过滤，计数并调整细胞密度。

5、接入培养瓶或皿中，置5%CO2温箱中培养。

细胞培养无菌操作规范

1. 打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。

2. 进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待30min以上，以排尽臭氧。

3. 穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。

4. 风淋2分钟。

5. 0.1%过氧乙酸水泡手，擦干。

6. 点燃酒精灯，超净台内应避免放入过多的物品，使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。

7. 打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘，打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。

8. 水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。

9. 同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系，吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm，避免伸入培养瓶口或试管口，以防止细胞系的互相混杂污染。

10. 漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。

11. 操作完毕后恢复工作台面。

售后规定：

1. 所有细胞免费售后期为一周，一周内细胞培养出现异常及时拍照反馈，超出一周没有任何反馈视为细胞培养正常，后期若出现培养问题不再免费重发。

2. 售后仅针对由于细胞自身状态问题导致不可传代的情况，若客户收货一周内已经传代或转移细胞多次，出现死亡或者污染时不予免费售后，若客户在我方未允许的情况下，擅自遗弃细胞，视为客户自身问题导致细胞异常，不予免费售后。

3.冻存细胞发货2管，客户先复苏一支，若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支，若客户未反馈并复苏2管失败，我方将不提供免费售后服务，冻存细胞售后均发复苏培养的，若要重发冻存细胞，需补加干冰运输费用。

HuH-7人肝癌细胞培养方法公司本着客户至上的原则，为客户提供高质量高品质的产品，公司承诺如有任何质量的问题请打电话与beat365官方网站工作人员联系，免费包退换（非人为因素造成的）会给您一个满意的答复。